Что такое зона деления в биологии: Зоны корня и их функции в таблице

Продольный разрез апикальной меристемы.

Как и в других меристематических областях, клетки апикальных меристем обычно маленькие и почти сферические. У них плотная цитоплазма и относительно немного мелких вакуолей (водянистые мешковидные оболочки). Некоторые из этих клеток, известные как инициалы, поддерживают меристему как постоянный источник новых клеток и могут многократно подвергаться митозу (делению клеток), прежде чем дифференцироваться в конкретные клетки, необходимые для роста корня или побега.Клетки, исходящие из апикальной меристемы, расположены в клонах частично дифференцированных тканей, известных как первичные меристемы. Есть три основных меристемы: протодерма, которая станет эпидермисом; наземная меристема, которая будет формировать основные ткани, включающие клетки паренхимы, колленхимы и склеренхимы; и прокамбий, который станет тканями сосудов (ксилема и флоэма).

Прибрежная область состоит из трех подзон, называемых супралиторальной зоной , литоральной зоной и сублиторальной зоной .Супралиторальная зона или «зона распыления» находится под водой только во время штормов и расположена между линией прилива и сушей. Приливная зона расположена между приливами и отливами. Сублитораль всегда находится под водой и находится ниже линии отлива. Эта зона простирается до того места, где континентальный шельф опускается в абиссальную плоскость.

Все, кроме участков у побережья и морского дна, называется пелагической зоной. Противоположный термин — это демерсальная зона, которая представляет собой воду, находящуюся рядом с берегом или морским дном и находящуюся под ее влиянием.Пелагиали делятся на эпипелагические, мезопелагические, батипелагические, абиссопелагические и гадопелагические.

Эпипелагическая зона простирается от поверхности до 200 м и является домом для самого большого биоразнообразия в море, в основном из-за наличия солнечного света, который позволяет фотосинтезирующим организмам процветать. Здесь водятся как морские растения, так и животные. На высоте 200–1000 м находится мезопелагическая зона, сумеречная зона, где часть света проходит сквозь нее, но не достигает уровня яркости, необходимого для фотосинтеза.

Батипелагическая зона находится на высоте 1000-4000 м и полностью темна. Здесь обитают биолюминесцентные организмы, одни из самых странных морских глубин.

Растения в батипелагической зоне отсутствуют.Животные, которые могут здесь жить, выживают за счет мертвого материала или детрита, который падает с поверхности на других животных, живущих в глубоком море. Гигантский кальмар является обитателем батипелагической зоны и служит источником пищи для глубоководных кашалотов. Большинство животных в абиссопелагической зоне, расположенной на глубине 4000 м, слепые и бесцветные из-за полного отсутствия света. Название «абиссопелагический» происходит от греческого, означающего «бездонная бездна», во времена, когда считалось, что глубокий океан никогда не кончается.Гадопелагическая зона — это область глубокой воды в самых глубоких океанских желобах. Hadopelagic от греческого означает «Аид» или греческий подземный мир.

Фотическая зона ( с освещением ) открытого океана состоит из эпипелагиали и мезопелагиали. Афотическая зона ( без света ) открытого океана состоит из всех нижних зон океана. Нижние зоны часто просто группируются морскими биологами в афотическую зону из-за их сходства.

Другие морские зоны

Абиссальная равнина — это плоская или пологая часть дна океана, достигающая глубины от 2200 до 5500 м.На абиссальной равнине камни погружены в дно океана из-за отсутствия поддерживающей тепловой энергии внизу. В результате получаются самые плоские и гладкие регионы мира. Абиссальные равнины обычно находятся между основанием континентального возвышения (или шельфа) и срединно-океаническим хребтом. Поверхность не всегда была гладкой, но была покрыта мелкозернистыми отложениями, такими как глина и ил, отложившимися из-за мутных течений и направившимися вниз по подводным каньонам в более глубокие области. Другие отложения, усиливающие эффект, — это частицы глиняной пыли, уносимые в море с суши, и крошечные кусочки мертвых растений и животных, падающие с поверхностных слоев.В Тихом океане меньше всего абиссальных равнин, что является прямым результатом захвата отложений в подводных желобах, окружающих Тихий океан.

Океанские траншеи

Желоба в океане — это узкие и длинные впадины на дне океана. Это самые глубокие участки дна океана, их длина обычно составляет несколько сотен километров. Траншеи возникают в результате движения тектонических плит, иногда ныряющих (погружающихся) под другую плиту глубоко в дно океана.Обычно они простираются на 3-4 км ниже дна окружающего океана. Марианская впадина — самая глубокая часть океана, она была обнаружена во время путешествия к Бездне Челленджера.

Основными океанскими желобами являются Каймановы желоба на максимальной глубине 7686 м, Японские желобы на максимальной глубине 9000 м, желоб Кермадек, Алеутский желоб, Курильский желоб, Марианский желоб, Среднеамериканский желоб, Перу-Чилийский желоб. на максимальной глубине 8065 м, желоб Пуэрто-Рико, желоб Рюкю (или желоб Нансей-Шото), желоб Сундра и желоб Тонга на максимальной глубине 10882 м.

AP Biology Notecards: Chapter 36 Flashcards

TANGLED1 опосредует взаимодействия микротрубочек, которые могут способствовать позиционированию плоскости деления у кукурузы | Журнал клеточной биологии

Цитоскелет микротрубочек служит динамической структурной основой митоза в эукариотических клетках.TANGLED1 (TAN1) — это связывающий микротрубочки белок, который локализуется в месте деления и митотических микротрубочках и играет критическую роль в ориентации плоскости деления у растений. Здесь, эксперименты in vitro демонстрируют, что TAN1 напрямую связывает микротрубочки, опосредуя взаимодействие микротрубочек или концевых микротрубочек, в зависимости от их контактного угла. Мутантные клетки кукурузы tan1 неправильно позиционируют препрофазную полосу (PPB), которая предсказывает сайт будущего деления. Однако моделирование на основе формы клеток показывает, что дефекты позиционирования PPB скорее всего являются следствием аномальных форм клеток, а не из-за отсутствия TAN1.В телофазе совместная локализация растущих микротрубочек заканчивается от фрагмопласта с TAN1 в месте деления, это указывает на то, что TAN1 взаимодействует с кончиками микротрубочек на конце. Вместе наши результаты подтверждают, что TAN1 вносит вклад в организацию микротрубочек, чтобы гарантировать правильную ориентацию плоскости деления.

Правильная организация сетей микротрубочек во время интерфазы и митоза важна для стимулирования роста и развития как на клеточном, так и на уровне организма (Wasteneys and Ambrose, 2009; Elliott and Shaw, 2018; Ehrhardt and Shaw, 2006; Baskin et al., 2004). Механизмы достижения и модуляции организации микротрубочек управляются взаимодействиями микротрубочка-микротрубочка или микротрубочка-белок, включая застегивание молнии при низких углах смачивания (Ho et al., 2012; Tulin et al., 2012; Smertenko et al., 2004; Shaw et al. ., 2003), контактно-опосредованная катастрофа (Dixit, Cyr, 2004), разрушение (Lindeboom et al., 2013; Zhang et al., 2013; Panteris et al., 2018; Komis et al., 2017) и стабилизация на краях клеток (Ambrose et al., 2011). Эти процессы изменяют динамику и организацию микротрубочек.Эти активности формируют и модифицируют структуры митотических микротрубочек, чтобы выполнять особую роль в сегрегации ДНК и разделении дочерних клеток. У растений ключевыми митотическими структурами являются препрофазная полоса (PPB), метафазное веретено и фрагмопласт. Белки, которые регулируют образование и функцию этих структур, расположены вдоль этих различных структур, а также в месте деления коры растения.

Во время фазы G2 клеточного цикла PPB формируется как кольцевая структура из микротрубочек, актина и связанных белков, которые локализуются непосредственно под плазматической мембраной, образуя зону кортикального деления (Smertenko et al., 2017; Ван Дамм и др., 2007). PPB — это ранний маркер будущего подразделения наземных заводов; он указывает место, где развивающаяся новая клеточная стенка будет сливаться с материнской клеткой (Rasmussen and Bellinger, 2018; Facette et al., 2019; Pickett-Heaps and Northcote, 1966). Некоторые белки, ассоциированные с микротрубочками, играют важную роль в ориентации плоскости деления, способствуя образованию PPB. Большое семейство белков с мотивами, связывающими микротрубочки, привлекает комплекс протеинфосфатазы типа 2А для образования PPB (Spinner et al., 2010, 2013; Райт и др., 2009; Traas et al., 1995; Древенсек и др., 2012; Schaefer et al., 2017). Правильное формирование и расположение PPB может ориентировать веретено метафазы, чтобы способствовать быстрой митотической прогрессии (Chan et al., 2005; Ambrose and Cyr, 2008; Schaefer et al., 2017). Когда клетки входят в метафазу, PPB полностью разбирается; однако несколько белков, которые совместно локализуются с PPB, продолжают метить сайт деления до конца цитокинеза (Walker et al., 2007; Xu et al., 2008; Липка и др., 2014; Мартинес и др., 2017; Ли и др., 2017; Buschmann et al., 2015).

TAN1 связывается с микротрубочками, стабилизированными таксолом, в анализе с наложением блоттинга (Smith et al., 2001). Чтобы количественно оценить связывание TAN1 с микротрубочками, мы рекомбинантно экспрессировали 6xHIS-меченный белок ZmTAN1 (HIS-TAN1) и протестировали его способность связываться с микротрубочками. Белок HIS-TAN1 связался с микротрубочками, стабилизированными таксолом, в экспериментах по совместной седиментации (рис. 1 A). Титрование микротрубочек против фиксированной концентрации HIS-TAN1 приводило к насыщаемому связыванию TAN1 с микротрубочками. Гиперболическая подгонка данных о связывании, как и в аналогичных исследованиях (Tulin et al., 2012; Wong and Hashimoto, 2017), дала K _0.5 1,08 мкМ (95% доверительный интервал [CI], 0,722–1,43 мкМ) и предполагал, что по крайней мере 70% HIS-TAN1 были активны в связывании микротрубочек. Это рассчитанное сродство аналогично таковому у других белков, связывающих микротрубочки (Tulin et al., 2012; Portran et al., 2013; Wong and Hashimoto, 2017). Значительно меньше, чем 100% насыщение TAN1 наблюдалось при максимальной доступной концентрации микротрубочек. Это можно объяснить с точки зрения неактивной белковой фракции, но, альтернативно, с помощью модели, такой как многосайтовое связывание с отрицательной кооперативностью (Таблица S1).Чтобы непосредственно визуализировать связывание TAN1 с микротрубочками in vitro, мы очистили рекомбинантный HIS-TAN1-GFP. К сожалению, этот гибридный белок не был флуоресцентным, возможно потому, что GFP не укладывался правильно во время ренатурации рекомбинантного белка из бактериальных телец включения. Поскольку HIS-TAN1-GFP все еще связывается с микротрубочками со сродством, аналогичным HIS-TAN1 (рис. S1 A), мы пометили его органическим флуорофором Atto488, чтобы визуализировать его с помощью флуоресцентной микроскопии. При совмещении со стабилизированными таксолом и меченными родамином микротрубочками, HIS-TAN1-GFP, меченный Atto488 (100 нМ), локализуется вдоль решетки микротрубочек (рис.1, Г и Д). Кимограммы HIS-TAN1-GFP, меченного Atto488, показали, что он не перемещался по микротрубочкам, меченным биотинилированным гуанозин-5 ‘- (α, β-метилен) трифосфатом (GMPCPP) родамином, в течение ∼2 минут визуализации (рис. 1, F. и G). HIS-TAN1-GFP, меченный Atto488, к сожалению, агрегировался в ходе анализов коседиментации микротрубочек (рис. S1 B), и поэтому мы не использовали его в дальнейших экспериментах.

Предыдущие результаты показали, что TAN1-YFP колокализуется с микротрубочками PPB, веретена и фрагмопласта (Martinez et al., 2017). Однако прямые данные о связывании TAN1 с микротрубочками подтверждают, что TAN1 будет взаимодействовать с микротрубочками независимо от стадии клеточного цикла. Чтобы изучить взаимодействие TAN1 и микротрубочек в интерфазе, мы временно экспрессировали как TAN1-GFP, так и RFP-TUBULIN в неделящихся эпидермальных клетках Nicotiana benthamiana , используя конститутивный промотор 35S . Через 3 дня инкубации мы визуализировали TAN1-GFP и RFP-TUBULIN с помощью конфокальной микроскопии. TAN1-GFP колокализован с RFP-TUBULIN (рис. S2, A и B), что указывает на то, что митоз-специфические белки не необходимы для взаимодействия TAN1 с микротрубочками, что согласуется с нашими анализами совместной седиментации in vitro.Никаких очевидных различий в массивах микротрубочек в интерфазных эпидермальных клетках не наблюдалось между теми, которые инфильтрированы RFP-TUBULIN и TAN1-GFP (рис. S2, A и B) или только RFP-TUBULIN (рис. S2 C). Это отсутствие очевидных изменений в организации микротрубочек контрастирует с избыточной экспрессией др. MAPs, таких как MAP65-1 (Ho et al., 2012) и CLASP (Kirik et al., 2007). Однако флуоресцентный сигнал TAN1-GFP также был низким, что согласуется с гипотезой о том, что уровни TAN1 могут посттрансляционно регулироваться деградацией (Rasmussen et al., 2011).

Чтобы определить, регулирует ли TAN1 динамику полимеризации микротрубочек, мы провели эксперименты по полимеризации микротрубочек in vitro. Микротрубочки зародились из семян микротрубочек, стабилизированных GMPCPP, и их полимеризация и деполимеризация стимулировались добавлением 17,5 мкМ тубулина. Динамику микротрубочек визуализировали с помощью тубулина, меченного родамином, и флуоресцентной микроскопии полного внутреннего отражения (TIRF) (Материалы и методы).При более низких концентрациях HIS-TAN1 (<1 мкМ) не наблюдалось значительного влияния на динамику микротрубочек (таблица 1). При концентрации 2 мкМ HIS-TAN1, которая близка к кажущемуся значению K _0,5 TAN1 для микротрубочек, стабилизированных таксолом, мы наблюдали небольшое снижение как скорости роста плюс-конца микротрубочек, так и скорости усадки плюсового конца (по сравнению с 0 мкМ HIS-TAN1 с использованием критерия Манна – Уитни; таблица 1). Добавление HIS-TAN1 не изменило количество времени, в течение которого микротрубочки росли, или частоту катастроф.Однако наблюдались небольшие, но существенные различия во времени, затрачиваемом на усадку (по сравнению с 0 мкМ HIS-TAN1; Таблица 1). В используемых экспериментальных условиях события спасения были редкими, а отрицательные концы не были динамическими; следовательно, эти параметры не были определены количественно. Вместе эти результаты указывают на то, что регуляция динамики полимеризации микротрубочек вряд ли является основной функцией TAN1.

В ходе наших экспериментов по динамике микротрубочек in vitro мы наблюдали, что при высоких концентрациях HIS-TAN1 (2 мкМ) микротрубочки, которые контактировали друг с другом, временно взаимодействовали.Чтобы способствовать взаимодействию микротрубочек, мы провели эксперименты с более высокой концентрацией семян, стабилизированных GMPCPP, и свободных димеров тубулина (концентрация 22,5 мкМ) для создания большего количества микротрубочек, которые становились длиннее и, следовательно, чаще встречались друг с другом. Мы использовали 2 мкМ HIS-TAN1, потому что это привело к взаимодействиям микротрубочек (139 событий взаимодействия в результате 506 пересечений) в динамических анализах микротрубочек, тогда как при более низких концентрациях HIS-TAN1 взаимодействия не наблюдались (таблица 1).Мы наблюдали два типа взаимодействий связывания микротрубочек в зависимости от краевого угла микротрубочек. При малых или неглубоких углах смачивания (угол = 19,6 ° ± 7,6 ° [среднее ± стандартное отклонение]) микротрубочки постепенно соединяются вместе, образуя пучки ( n = 47 событий объединения из 139 наблюдаемых взаимодействий [34% случаев объединения в пучки]. события]; рис. 2, А и Б). Застегивание микротрубочек в параллельной и антипараллельной конфигурациях происходило с аналогичными частотами ( n = 13/27 и 14/27, где ориентация была однозначной, соответственно).Следовательно, TAN1 предпочтительно не связывает микротрубочки в определенных ориентациях. Напротив, белки связывания микротрубочек MAP65 преимущественно связывают антипараллельные микротрубочки (Gaillard et al., 2008; Tulin et al., 2012). При высоких углах смачивания (угол = 60 ° ± 20 ° [среднее ± стандартное отклонение]) во время деполимеризации микротрубочек наблюдались временные взаимодействия «конец-на» микротрубочек (рис. 2, C и D; видео 1). Когда одна микротрубочка деполимеризуется мимо предыдущего сайта кроссовера, TAN1 опосредует взаимодействие в точке кроссовера.Деполимеризующийся конец оставался связанным с боковой стенкой второй микротрубочки, что приводило к растягивающей силе на стабильной микротрубочке ( n = 92 концевых взаимодействия из 139 наблюдаемых взаимодействий [66% событий взаимодействия]). Интересно, что высокоосновные пептиды, связанные вместе с образованием искусственного полипептида, способного к мультивалентному электростатическому взаимодействию с микротрубочками, проявляют сходную с TAN1 активность по вытягиванию и связыванию микротрубочек (Drechsler et al., 2019).Внутренне неупорядоченный белок тау, связанный с микротрубочками, также приводит к аналогичным взаимодействиям с микротрубочками, которые, как полагают, зависят от связывания мультивалентных микротрубочек тау (Kellogg et al., 2018). Основываясь на сходстве типов взаимодействий микротрубочек, опосредованных искусственным полипептидом тау и TAN1, и их общих биохимических характеристиках чистого положительного заряда и внутренне неупорядоченных областей, мы предполагаем, что TAN1, вероятно, содержит несколько сайтов связывания микротрубочек, которые обеспечивают взаимодействие между микротрубочками.Это свойство д. Также позволить TAN1 связывать микротрубочки без необходимости димеризации или мультимеризации в отличие от связывающего белка MAP65-1 (Ho et al., 2011). Основываясь на этих данных, мы заключаем, что результаты взаимодействий TAN1 с микротрубочками зависят от начального угла контакта или перекрестного угла между микротрубочками и что при высоких углах смачивания взаимодействия TAN1 с микротрубочками приводят к временному притягиванию или захвату.

Застегивание микротрубочек — это хорошо охарактеризованная форма связывания микротрубочек у растений, животных и грибов (Dixit and Cyr, 2004; Tulin et al., 2012; Янсон и др., 2007; Субраманиан и др., 2010; Gaillard et al., 2008). Взаимодействия между концом микротрубочек широко изучены на животных и грибах и обычно включают силы, генерируемые моторными белками (Laan et al., 2012a, b). Напр., Захват микротрубочек на концах моторными белками важен для позиционирования веретена у животных (Kiyomitsu, 2019) и дрожжей (Gupta et al., 2006). Немоторно-зависимые механизмы, такие как использование энергии деполимеризующейся микротрубочки, также генерируют тянущие силы (Dogterom et al., 2005; Грищук и др., 2005). TAN1, поскольку он лишен канонических моторных доменов, вряд ли может быть моторным белком. Однако, подобно связывающему микротрубочки белку tau, он является одновременно высокоосновным и, как предполагается, содержит внутренне неупорядоченные области при анализе с помощью программного обеспечения для прогнозирования DisEMBL (Linding et al., 2003).

Мы были удивлены тем, что значительное количество взаимодействий микротрубочек было обнаружено in vitro только с относительно высокими концентрациями TAN1 (2 мкМ), когда взаимодействия TAN1-MT были обнаружены с использованием стабилизированных GMPCPP семян микротрубочек при низких концентрациях TAN1 (100 нМ).Одна потенциальная причина этого очевидного несоответствия в связывании или взаимодействии может быть связана с TAN1 связывающими димерами тубулина в дополнение к микротрубочкам. Связывание димера тубулина в дополнение к связыванию микротрубочек происходит с такими белками, как тау (Fauquant et al., 2011) или Clasp (Al-Bassam et al., 2010). Поэтому мы проверили, связывает ли TAN1 растворимый тубулин, с помощью аффинной хроматографии in vitro. Тубулин инкубировали с HIS-TAN1-GFP и гранулами агарозы против GFP. HIS-TAN1-GFP снижает тубулин, в то время как HIS-GFP — нет, что указывает на то, что TAN1 взаимодействует с тубулином в дополнение к полимерам микротрубочек (рис.S3 A). Путем денситометрического анализа мы оценили, что одна молекула HIS-TAN1-GFP связывается приблизительно с двумя димерами тубулина ( n = 3 повтора), что указывает на то, что TAN1 содержит по крайней мере две отдельные тубулин-связывающие области. Мы использовали эксклюзионную хроматографию, чтобы оценить, был ли тубулин димерным в буфере для аффинной хроматографии (BRB80) и в температурных условиях (~ 4 ° C). Тубулин элюируется с кажущимся размером ~ 110 кДа, что согласуется с димеризацией тубулина с использованием одинаковой концентрации тубулина, используемой для аффинной хроматографии (5 мкМ, 91.45 ± 12,32 кД [среднее ± стандартное отклонение]) и вдвое больше (10 мкМ, 111,13 ± 14,18 кД [среднее ± стандартное отклонение]; рис. S3, B и C). В целом это указывает на то, что TAN1 связывает тубулин в двух разных регионах. Связывание TAN1 с тубулином может потенциально изолировать TAN1 как в динамических анализах микротрубочек, так и in vivo. Альтернативно, связывание TAN1 с тубулином может способствовать спасению микротрубочек, подобно Clasp (Al-Bassam et al., 2010). Дальнейшие эксперименты должны быть выполнены, чтобы определить, димеризуется или мультимеризуется TAN1, происходит ли связывание тубулина in vivo и перекрываются ли сайты связывания тубулина и микротрубочек, а также их относительное сродство.

Дефекты ориентации плоскости деления могут возникать на ранних этапах клеточного цикла, до образования PPB или позже, после того, как PPB уже сформирован. Мы показали с помощью визуализации живых клеток, что tan1 мутантные фрагмопласты не вернулись в сайт деления, ранее отмеченный PPB, что указывает на более поздний дефект в ориентации плоскости деления (Martinez et al., 2017). Напротив, предыдущая работа показала, что ориентация PPB более вариабельна у мутанта tan1 по сравнению с клетками WT, что указывает на потенциальный дефект размещения PPB (Cleary and Smith, 1998; Mir et al., 2018). Однако неясно, вносит ли TAN1 вклад в правильное размещение PPB, потому что белок TAN1 не накапливается в месте деления до конца G2, после того, как PPB уже сформировался (Martinez et al., 2017).

Предыдущие измерения размещения PPB были получены из двухмерных микрофотографий, которые могут неточно отражать положение PPB в 3D, особенно в ячейках неправильной формы. Чтобы преодолеть этот недостаток, мы использовали наш недавно разработанный подход к математическому моделированию для точного прогнозирования трехмерных плоскостей разделения (Martinez et al., 2018). Эта модель генерирует минимумы мыльной пленки из реальных трехмерных форм клеток и позволяет нам сравнивать чисто геометрические предсказания с сайтами деления клеток in vivo (Martinez et al., 2018). Большинство предсказанных делений близко совпадают с делениями клеток животных и растений in vivo (Martinez et al., 2018). Мы собрали конфокальные Z-стеки и использовали программу обработки изображений MorphoGraphX ​​(Barbier de Reuille et al., 2015) для извлечения WT (рис. 3 A) и tan1 мутантных трехмерных форм клеток (рис. 3 B). Затем мы использовали Surface Evolver для создания трехмерных реконструкций ячеек.Затем функция градиентного спуска в Surface Evolver использовалась для создания минимумов мыльной пленки, которые делили объем на две равные половины. Эти минимумы мыльной пленки являются предсказаниями s плоскости деления (Martinez et al., 2018; Brakke, 1992). Затем предсказанные плоскости деления сравнивали с положением PPB in vivo (рис. 3, A и B). Чтобы измерить смещение между предсказанным делением и положением PPB, мы сравнили положение средней плоскости PPB с внешним краем предсказанного деления.Когда значение смещения PPB низкое, прогноз соответствует плоскости деления in vivo. Для клеток WT среднее смещение PPB от предсказанных делений составило 0,40 мкм ² ± 0,96 (среднее ± SD, n = 16), в то время как смещение PPB было выше у мутантов tan1 (смещение PPB = 1,85 мкм ² ± 3,93, среднее ± стандартное отклонение, n = 45; P = 0,0012, Манн – Уитни; рис. 3 C).

Чтобы определить, вызвано ли повышенное смещение PPB у мутантов tan1 неправильным размещением PPB или косвенным следствием аномальной формы клеток у мутанта tan1 , мы разработали количественный метод сравнения форм клеток, названный «индексом аномальности». измерение расстояния между центром площади поверхности и центром объема (см. Материалы и методы).Клетки WT имели примерно в три раза более низкий и более устойчивый индекс аномалии по сравнению с мутантными клетками tan1 (рис. 3 D; клетки WT: n = 16, индекс аномальности [средний ± SD] = 0,14 ± 0,1; tan1 : n = 45, индекс аномальности = 0,39 ± 0,35; P <0,0008, Манна – Уитни). Эти данные подтверждают, что растения WT имеют тенденцию иметь клетки нормальной формы, в то время как мутанты tan1 имеют клетки как нормальной, так и аномальной формы, что согласуется с данными визуализации.

Если TAN1 играет непосредственную роль в размещении PPB, мы могли бы ожидать аномального размещения PPB у мутантов tan1 независимо от вариаций индекса аномальности формы клеток. Напротив, мы обнаружили значительную положительную корреляцию между индексом аномалии и смещением PPB в мутантных клетках tan1 (коэффициент корреляции Спирмена = 0,59, P <0,0001, n = 45 клеток), предполагая, что размещение PPB отклонялось от предсказанных делений больше в клетки очень аномальной формы.Чтобы выяснить, была ли эта тенденция аналогичной в клетках WT, мы специально искали и моделировали дополнительные клетки WT, которые отображали аберрантную форму клеток с высокими индексами аномальности (коэффициент корреляции Спирмена = 0,57, значение P = 0,003 n = 25 клеток). Как WT, так и tan1 мутантные клетки с более высокими индексами аномальности обычно имели более высокие смещения PPB для всего набора данных (рис. 3 E, левая панель), а также набор данных, удаляющий выбросы (рис. 3 E, правая панель), с примерами клетки с высокими показателями аномальности, представленные на (рис.3, F – J). Из-за корреляции между дефектами размещения PPB и аберрантной формой клеток у мутантов tan1 мы предполагаем, что дефекты размещения PPB являются следствием аномалий формы клеток и не связаны напрямую с функцией TAN1 во время G2.

Подходы к моделированию, основанные на организации микротрубочек, предполагают, что межфазное расположение кортикальных микротрубочек может быть важным модулятором позиционирования PPB (Chakrabortty et al., 2018; Mirabet et al., 2018). Ориентация PPB обычно следует ориентации предшествующего межфазного массива микротрубочек (Flanders et al., 1989; Gunning and Sammut, 1990). Наш результат предполагает, что клетки с изначально аномальной формой могут привести в следующем раунде клеточного деления к менее геометрически точно размещенным PPBs. Этот эффект может объяснить, почему др. Мутанты в плоскости деления имеют смещенные или наклонные PPBs (Müller et al., 2006; Pietra et al., 2013). Кроме того, мутанты с дефектами роста клеток, которые вызывают аберрантную форму клеток, могут также приводить сначала к дезориентированным PPBs, а затем к явным дефектам плоскости деления.

Ранее мы показали, что мутантные клетки tan1 имеют задержку митотической прогрессии во время метафазы и телофазы, но мы не предложили конкретной гипотезы, чтобы объяснить, почему возникают задержки (Martinez et al., 2017). Если TAN1 играет важную роль в перекрестном связывании микротрубочек веретена, то задержки метафаз могут отражать дефектную организацию веретена. Используя покадровую визуализацию, мы оценили общую морфологию веретена в клетках листьев кукурузы, экспрессирующих YFP-TUBULIN.В клетках WT мы всегда наблюдали биполярные веретена ( n = 38; Рис. 4 A). В мутантных клетках tan1 веретена иногда демонстрировали отсроченную биполярную организацию (13,5%; n = 5/35), но восстанавливались через ~ 20 ± 8 мин (среднее ± стандартное отклонение) после разрушения ядерной оболочки на типичные биполярные веретена (рис. 4 B и видео 2). Задержки метафаз, ранее описанные у мутантов tan1 , встречались часто, что приводило к средней задержке в 1,5 раза по сравнению с WT (Martinez et al., 2017), тогда как задержанные дефекты организации биполярного веретена встречались реже. Это указывает на то, что дефекты в организации микротрубочек только иногда приводят к обнаруживаемым дефектам в организации веретена у мутантов tan1 , что согласуется с избыточными механизмами сборки веретена. Метафазная микротрубочка веретена s Сшивание или связывание важно для правильной и своевременной сборки веретена (Masoud et al., 2013; Mullen and Wignall, 2017; Ambrose and Cyr, 2007; Winters et al., 2019). Основываясь на слипании микротрубочек in vitro с помощью TAN1, возможно, что TAN1 обеспечивает связывание микротрубочек веретена, когда они встречаются друг с другом под небольшими углами. Т.о., локализация TAN1 в веретене может быть важна для правильной сборки веретена и митотической прогрессии через метафазу.

Чтобы понять, как TAN1 может опосредовать наведение фрагмопластов во время телофазы (Martinez et al., 2017; Mir et al., 2018) мы визуализировали TAN1 и микротрубочки в месте деления. CFP-TUBULIN-меченные микротрубочки и TAN1-YFP были визуализированы вместе в клетках, претерпевающих продольные деления, где наведение фрагмопластов визуализируется более легко. Совместную локализацию CFP-TUBULIN и TAN1-YFP на участке деления оценивали в коре клеток после первоначального контакта фрагмопласта. Небольшое количество микротрубочек фрагмопласта совместно локализуется с точками TAN1 (коэффициент корреляции Пирсона = 0,23 ± 0,078 [среднее ± стандартное отклонение], n = 21), но примерно половина точек TAN1 связана с микротрубочками (коэффициент перекрытия Мандерса [C] = 0.41 ± 0,1 [среднее ± стандартное отклонение]; Рис. 4 C). Вместе эти результаты подтверждают, что небольшая субпопуляция микротрубочек от переднего края фрагмопласта взаимодействует с кортикальными точками TAN1, поскольку фрагмопласт расширяется через сайт деления (Fig. 4, D and E; and Video 3). Эти точки TAN1 в месте деления, по-видимому, не подвижны при визуализации в течение ~ 5 мин ( n = 8 клеток; Рис. 4, F и G).

Модели для руководства фрагмопластом ранее предполагали, что передние края микротрубочек фрагмопласта взаимодействуют с белками в месте кортикального деления либо посредством специфических межбелковых взаимодействий, либо микротрубочек-белковых взаимодействий (Herrmann et al., 2018; Липка и др., 2014; Ли и др., 2017). POK2, который локализован в сайте деления, как было показано, является кинезином, направленным на плюс-конец (Chugh et al., 2018). POK2 может эффективно давить на положительные концы микротрубочек, которые встречаются с сайтом деления (Chugh et al., 2018). POK2 также напрямую взаимодействует с MAP65-3, который локализован в связанных микротрубочках как в средней зоне фрагмопласта, так и на переднем крае, служа еще одним потенциальным типом взаимодействия между фрагмопластом и местом деления.Локализация TAN1 в месте деления важна для его функции в ведении фрагмопластов (Mir et al., 2018; Martinez et al., 2017). Основываясь на результатах этого исследования, мы предполагаем, что концевые взаимодействия между плюс-концами микротрубочек переднего края фрагмопласта и TAN1-YFP puncta в месте деления могут оказывать тянущие силы на эти микротрубочки, чтобы направлять траекторию фрагмопластов.

В то время как TAN1 долгое время был охарактеризован как белок, связывающий микротрубочки, функциональное значение этого открытия оставалось неуловимым.Наш in vitro анализ активности TAN1-микротрубочек в сочетании с наблюдениями в реальном времени локализации TAN1 на микротрубочках веретена и на концах передних краев микротрубочек фрагмопласта предполагает, что взаимодействия TAN1-микротрубочки могут зависеть от геометрии встреч микротрубочек. Это обеспечивает правдоподобное объяснение того, как TAN1 способствует организации веретена и ведению фрагмопластов.

Оптимизированная по кодонам кДНК, кодирующая HIS-TAN1 и HIS-TAN1-GFP кукурузы, была синтезирована in vitro с последующей экспрессией и очисткой белка, все выполнялось Genscript. Escherichia coli штамм SHuffle трансформировали рекомбинантной плазмидой, кодирующей HIS-TAN1. После обработки осадка клеток ультразвуком и центрифугирования осадок растворяли с использованием мочевины с последующей аффинной очисткой. E.coli штамм BL21 Star (DE3) трансформировали рекомбинантной плазмидой, кодирующей HIS-TAN1-GFP. После обработки осадка клеток ультразвуком и центрифугирования осадок растворяли с использованием мочевины с последующей аффинной очисткой (Genscript). Белки подвергали повторной укладке и стерилизовали фильтрованием.Концентрации HIS-TAN1 и HIS-TAN1-GFP проверяли с помощью анализа белка BCA (Genscript). После повторной укладки HIS-TAN1-GFP больше не был флуоресцентным. Следовательно, HIS-TAN1-GFP был помечен красителем Atto488. HIS-TAN1-GFP конъюгировали с Atto488-малеимидом (Sigma; 28562). 4 мкМ HIS-TAN1-GFP в 80 мМ трубках, 1 мМ MgCl ₂ и 1 кмМ EGTA-буфер восстанавливали с помощью 12,5 мкМ трис (2-карбоксиэтил) фосфин гидрохлорида в течение 10 минут с последующей 4-часовой инкубацией с 250 мкМ. Atto488 растворяли в ДМСО (10 мМ) при комнатной температуре.Избыток непрореагировавшего красителя удаляли, пропуская образец через обессоливающую колонку 10DG (Bio-Rad; 732–2010) и концентрируя с помощью концентратора с мембраной из полиэфирсульфона с отсечкой молекулярной массы 30 кДа (30K MWCO PES) (Thermo; 88521). Активность HIS-TAN1-GFP и HIS-TAN1-GFP-Atto488 (~ 80% степень мечения) подтверждали с помощью анализа совместимости микротрубочек. Конъюгацию красителя Atto488 определяли путем визуализации результатов анализа совместимости микротрубочек в эксперименте SDS-PAGE с использованием источника УФ-света, показывающего флуоресцентные полосы, соответствующие HIS-TAN1-GFP, меченному Atto488.

5-недельный возраст N. benthamiana растения, выращенные в условиях стандартного 16-часового освещения и 8-часовой темноты, использовали для временных экспериментов по совместной локализации. Плазмиды для конститутивной экспрессии вирусного белка p19, RFP-TUBULIN6 (Ambrose et al., 2011) и TAN1-GFP (Walker et al., 2007) трансформировали в штамм Agrobacterium tumefaciens GV3101. Агробактерии выращивали до стационарной фазы, центрифугировали со скоростью 1000 об / мин, а затем ресуспендировали в течение 1 часа при комнатной температуре в буфере для инфильтрации, содержащем 10 мМ MES (pH 5.7), 10 мМ MgCl ₂ , 0,5% D-глюкозы (вес / объем) и 200 мкМ ацетосирингона. Равные количества агробактерий (с TAN1-GFP и без него) смешивали вместе и использовали шприц объемом 1 мл без иглы для инфильтрации абаксиальной стороны листьев N. benthamiana . После 3 дней инкубации листья удаляли и абаксиальные эпидермальные клетки получали с помощью вращающегося конфокального дискового микроскопа с описанным выше объективом 60 ×. Проекции максимальной интенсивности и автоматическое вычитание фона в FIJI использовались на рис.S2.

Динамику микротрубочек in vitro проводили в соответствии с предыдущими протоколами (Dixit and Ross, 2010). Проточные камеры были собраны с использованием силанизированных покровных стекол и двусторонней липкой ленты с объемом камеры ∼20 мкл. Для покрытия поверхности использовали 20% моноклональное антитело против биотина (Sigma; клон BN-34) с последующим блокированием 5% плюроником F-127 (Sigma; # P2443) в течение 5 минут на каждом этапе. Затем в клетку пропускали семена микротрубочек родамина и GMPCPP.Рост микротрубочек был инициирован с использованием 17,5 мкМ 1:25 меченного родамином тубулина крупного рогатого скота в 80 мМ Pipes, 1 мМ MgCl ₂ , 1 мМ EGTA с 0,15% метилцеллюлозы (вес / объем), 100 мМ DTT, поглотители кислорода (250 мкг / мл глюкозооксидазы, 25 мкг / мл каталазы), 5 мг / мл глюкозы и 2 мМ GTP вместе с указанным количеством белка HIS-TAN1. Для оценки связывания микротрубочек в реакции использовали более высокую концентрацию тубулина (22,5 мкМ, 1:25 родамин-тубулин / немеченый тубулин), чтобы способствовать росту микротрубочек и пересечениям.Для каждой концентрации и условий эксперимента готовили по крайней мере два предметных стекла. Образцы возбуждали твердотельным лазером с диодной накачкой 561 нм (при выходной мощности 4 мВт) (Melles Griot) и визуализировали через 100-кратный объектив (NA 1,45) и камеру электронного умножителя с зарядовой связью с задней подсветкой и набор эмиссионных фильтров 582–636 нм с использованием TIRF (Hammamatsu; ImageEM). Изображения собирались каждые 2 с. Кимографы использовались для анализа данных в FIJI (Schindelin et al., 2012).

Образцы из WT и tan1 мутантных растений кукурузы , экспрессирующих YFP-TUBULIN (α-тубулин, слитый с цитриновым вариантом YFP; Mohanty et al., 2009) были рассечены до симметрично делящихся листовых зон для определения местоположения PPB. Чтобы идентифицировать контуры клеток для трехмерной реконструкции, образцы либо окрашивали 0,1 мМ пропидиум йодидом, либо экспрессировали собственный белок 2-1 плазматической мембраны, слитый с CFP, чтобы очертить плазматические мембраны (Mohanty et al., 2009). 3D-реконструкции формы клеток были созданы с использованием MorphoGraphX, а 3D-реконструкции PPB были созданы с использованием обучаемой сегментации Weka (Barbier de Reuille et al., 2015; Arganda-Carreras et al., 2017). Клетки были собраны более чем с трех отдельных растений для каждого генотипа. Предыдущий протокол использовался для моделирования симметричных делений путем минимизации мыльной пленки с использованием Surface Evolver (Brakke, 1992; Martinez et al., 2018). Эта модель генерирует минимумы мыльной пленки из реальных трехмерных форм клеток, чтобы явно проверить гипотезу о том, что деления растительных клеток имитируют математически предсказанные минимумы мыльной пленки (Errera, 1888). Как мы ранее продемонстрировали как для растительных, так и для животных клеток, большинство предсказанных делений близко совпадают с делениями in vivo (Martinez et al., 2018). Эта модель не принимает во внимание межклеточные взаимодействия, механические сигналы или сигналы развития. Вкратце, контуры ячеек были сглажены с использованием сферических гармоник 30-й степени с последующей минимизацией площади поверхности из 241 исходной плоскости с нормалями, равномерно распределенными по сфере. Для измерений смещения PPB расстояние между средней плоскостью PPB и поверхностью прогнозируемого разделения измерялось в квадрате микрон. Индекс аномальности определялся расстоянием между центром поверхности области и центром объема клетки.Конвейер Surface Evolver можно загрузить с GitHub (https://github.com/jdhayes/predictive_division/).

Стабилизированные таксолом, меченные родамином микротрубочки и HIS-TAN1-GFP-Atto488 были визуализированы на перевернутом стенде Nikon Ti с вращающимся диском W1 (Yokogawa) и моторизованным столиком (ASI Piezo), запущенным с помощью программного обеспечения Micromanager (micromanager.org) и построен Solamere Technology. Промежуток времени для меченных родамином стабилизированных GMPCPP микротрубочек и HIS-TAN1-Atto488 также отображали на этом микроскопе.Используемые твердотельные лазеры (Obis) и эмиссионные фильтры (Chroma Technology) имели возбуждение 561 нм, эмиссию 620/60 нм для родамин-тубулин и возбуждение 488 нм, эмиссию 520/50 нм для HIS-TAN1-GFP-Atto488. Использовали 100-кратную масляную линзу (1,45 NA) и иммерсионное масло типа FF (Cargille; иммерсионное масло, 16212). Эпидермальные клетки кукурузы, использованные для моделирования, визуализировали с помощью объективов с погружением в воду 60 × с числовой апертурой 1,2. Для йодида пропидия использовали возбуждение 561 нм и эмиссию 620/60 нм, а для YFP-TUBULIN использовали возбуждение 514 нм и эмиссию 540/30 нм.Иммерсионная жидкость на основе перфторуглерода (Cargille; RIAAA-678) была использована на объективе.

Динамические микротрубочки, меченные родамином, возбуждали твердотельным лазером с диодной накачкой 561 нм (при выходной мощности 4 мВт) (Melles Griot) с использованием объектива 100 × (NA 1,45) и микроскопии TIRF, как описано выше. Изображения получали с помощью камеры электронного умножителя с зарядовой связью с задней подсветкой (Hamamatsu ImageEM) и наборов родаминовых фильтров (эмиссия 582–636 нм).

Данные совместной локализации TAN1-YFP и CFP-TUBULIN на фиг. 4 были собраны с использованием Zeiss LSM 880 Elyra, Axio Observer и масляной линзы 100 × / 1,46 NA (Cargille; иммерсионное масло, 16212). TAN1-YFP возбуждали с использованием 514 нм, в то время как CFP-TUBULIN возбуждали с использованием 458 нм и отображали с использованием режима Airyscan сверхвысокого разрешения с разделителем основного луча 458/514 и набором полос пропускания 420–480 + длиннопроходных фильтров 605. Изображения Airyscan обрабатывались с использованием настроек по умолчанию с использованием программного обеспечения Zen Black (Zeiss).

Благодарю г-жу Джоселин Аранда, г-на Кристофера Хойта и г-жу Сухмани Сидху за сбор некоторых изображений, используемых для представленной работы по моделированию. Спасибо доктору Хун Лян за помощь с временными анализами табака. Мы благодарим доктора Дэвида Картера (Калифорнийский университет, Риверсайд, штат Калифорния) за обучение Zeiss LSM 880. Мы благодарим профессора Лори Смит (Калифорнийский университет, Сан-Диего, Ла-Хойя, Калифорния) за плазмиду TAN1-GFP и проф.Крис Амброуз (Университет Саскачевана, Саскатун, Канада) для плазмиды RFP-TUBULIN. Мы также благодарим Калифорнийский университет, Риверсайдские сельскохозяйственные предприятия за теплицы и поля, а также Дэвида Ветовика (Калифорнийский университет, Риверсайд, Риверсайд, Калифорния) за полезное управление полями.

Эта работа финансировалась Национальным научным фондом (грант MCB1716972 К.Г. Расмуссену и грант MCB1453726 Р.Диксит) и Национального института продовольствия и сельского хозяйства Министерства сельского хозяйства США (К.Г. Расмуссен). Благодарим П. Мартинеса за финансирование диссертационной работы Фонда Форда.

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих финансовых интересов.

Вклад авторов: C.G. Расмуссен, Р. Диксит, А. Чжан, С.Е. О’Лири, К.А. Бракке предоставил оборудование, реактивы и руководство экспериментом. П. Мартинес и Р.С. Балкунде проводил эксперименты in vitro с Р.С. Балкунде предлагает помощь в рассадке микротрубочек. П. Мартинес сделал снимки, использованные для моделирования, и выполнил покадровую съемку живых клеток. П. Мартинес и А. Чжан выполнили эксклюзионную хроматографию. К.Г. Расмуссен, С. О’Лири и Р. Диксит руководили экспериментами. П. Мартинес и К.Г. Расмуссен проанализировал данные и сделал цифры, П. Мартинес и К.Г. Расмуссен написал рукопись с комментариями и правками соавторов.К.Г. Расмуссен, П. Мартинес и Р. Диксит получили финансирование.

Прибрежная зона — определение, организация и проверка

Определение прибрежной зоны

Прибрежную зону в водной экосистеме (река, озеро, море) можно определить по наличию солнечного света на уровне донных отложений и соответствующему росту частично погруженных или полностью погруженных водных растений. Он также обычно характеризуется обилием растворенного кислорода, питательных веществ, движения воды и чередования интервалов погружения и воздействия.

Как подробно показано на рисунке выше, литоральная зона обычно простирается от начального края побережья, где субстрат и населяющие его организмы часто подвергаются воздействию воздуха и риску высыхания, до начального края лимнетической зоны, где субстрат никогда не обнажается. Однако не существует единого общепринятого определения прибрежной зоны. В зависимости от того, кого вы спрашиваете и какую область изучаете, определение литоральной зоны немного варьируется, чтобы соответствовать конкретному контексту.

В прибрежной среде, например на пляже или на берегу, прибрежная зона включает сушу до отметки половодья, которая часто подвергается воздействию воздуха, и часто является взаимозаменяемой с термином «приливная зона». В морской биологии прибрежная зона включает области океана, простирающиеся до концов континентального шельфа, и может быть подразделена на три меньшие зоны в зависимости от областей приливного воздействия. От мелководья до глубоких эти зоны представляют собой супралиторальную зону, эулиторальную зону и сублиторальную зону.

В пресноводных средах, таких как озера или реки, прибрежная зона включает водно-болотные угодья или участки суши, сезонно или постоянно затопляемые водоемом. Здесь приливы несущественны и не используются для классификации области, охватываемой литоральной зоной. Вместо этого, различные типы обнаруженных прибрежных зон можно определить по глубине и чистоте воды, а также по профилю береговой линии. Типы зон, обнаруженных на более высоких и более низких высотах, соответственно, включают лесистые заболоченные земли, влажные луга, болота и субстрат, поддерживающий жизнь водных растений.

Организм прибрежной зоны

Прибрежная зона и ее подзоны представляют собой особую среду с одинаково отличительными организмами. Типы организмов, встречающихся на каждом уровне прибрежной зоны, адаптированы к конкретным проблемам, возникающим в каждом месте и его близости к воде и суше. В районах со значительным воздействием волн, таких как морское побережье и его приливные зоны, организмы адаптированы к ежедневным изменениям солености, влажности, турбулентности воды, температуры и хищничества со стороны наземных и морских существ.Кроме того, в зависимости от того, подвижны ли организмы или нет, механизмы выживания для питания и дыхания становятся более неотъемлемой частью их адаптации к выживанию.

Животные

Подвижные организмы, такие как крабы, улитки и блюдца, могут искать убежища от хищников и иссушающего солнца, прячась в тени, создаваемой камнями, водорослями, грязью или песком, а также небольшими трещинами, обнаруженными в их окружающей среде. . Другие подвижные животные, которых можно найти в зарослях донных отложений, включают грязевых креветок и червей.Неподвижные организмы, такие как ракушки или мидии, прикреплены органическим цементом к твердым субстратам, чтобы предотвратить их вынос в море приливом. Из-за того, что они неподвижны, эти организмы становятся уязвимыми для хищников морских звезд, особенно если они закреплены ближе к отложениям; однако, когда они бросают якорь в районах высоких приливов, эти существа могут сидеть вне досягаемости своих хищников и использовать свои панцири для захвата воды для использования во время отливов.

Растения

Многие виды растений приспособились к жизни, находясь под водой лишь частично, а другие приспособились к жизни, находясь под водой полностью.Eelgrass — это тип цветущей затопленной водной растительности (SAV) с корневищами, которые помогают накапливать излишки питательных веществ для последующего развития. Ленточный водоросль — это еще один тип SAV, который увеличивает количество получаемого солнечного света за счет использования наполненного воздухом пузыря, который помещает большую часть своего тела ближе к поверхности, где доступно больше света. У ламинарии развита очень прочная корневая система, которая удерживает организм на якоре к субстрату, несмотря на сильные волны, которые угрожают вытащить некорневые организмы в море.

Грибки

У таких видов, как лишайник, которые встречаются в скалистых приливных районах, есть симбионт грибов, который может накапливать воду и защищать их от высыхания, а также симбионт водорослей или цианобактерий, который фотосинтетически производит пищу для организма. Способность терять большое количество воды, высыхать, а затем возвращаться к жизни, когда вода становится доступной, делает лишайник впечатляюще устойчивым к засухе.

Викторина

1. Что является ограничивающим фактором для растений литорали?
А. Растворенный кислород
B. Вода
C. Воздух
D. Солнечный свет

Ответ на вопрос № 1

D правильный. Растения в прибрежной зоне ограничены в росте, численности и распространении количеством солнечного света, проникающего через воду. Чем больше света доступно, тем лучше для роста растений

2. Какое утверждение о литорали неверно?
A. Он богат растворенными питательными веществами и кислородом.
B. Выживание в прибрежной зоне во многом зависит от способности человека убегать от хищников.
C. Определение различается для морских и пресноводных экосистем.
D. Его можно разделить на более мелкие зоны.

Ответ на вопрос № 2

B правильный. Выживание в прибрежной зоне может зависеть от способности организма убегать от хищников; однако это не единственное средство выживания. Многие неподвижные организмы избегают нападения хищников, используя твердую оболочку или зарываясь в субстрат, где они могут остаться незамеченными.

3. Что не встречается в прибрежной зоне?
A. Водно-болотные угодья
B. Приливная зона
C. Супралитораль
D. Лимнетическая зона

Ответ на вопрос № 3

D правильный. Хотя водно-болотные угодья могут показаться заманчивым ответом, на самом деле они представляют собой тип экосистемы, обнаруженной в прибрежных зонах рядом с более крупными водоемами. Приливная зона — это меньшая зона в прибрежной зоне, включающая пляжи и берега.Супралитораль — еще одна меньшая зона литорали. Лимнетическая зона не является частью литорали; это следующая зона за литоральной зоной.

Список литературы

• Адаптации. (нет данных). Получено 8 июня 2017 г. с сайта http://intertidalproject.weebly.com/adaptations.html
.
• Интересные факты о грибах. (нет данных). Получено 8 июня 2017 г. с http://herbarium.usu.edu/fungi/FunFacts/lichens.htm
.
• Приливная зона. (2013, 14 ноября).Получено 8 июня 2017 г. с сайта https://www.crd.bc.ca/education/our-environment/ecosystems/coastal-marine/intertidal-zone
.
• Прибрежная зона. (2017, 4 июня). Получено 8 июня 2017 г. с сайта https://en.wikipedia.org/wiki/Littoral_zone
.